基因工程原理与技术 范桂枝　主编 化学工业出版社 rb kindle 网盘 umd 极速 下载 pdf mobi

本书分四个部分介绍基因工程原理与技术，即：（1）基因工程操作的四个基本条件――工具酶、载体、受体细胞和目的基因；（2）基因工程的主要操作技术路线――目的基因的分离制备、重组子的构建、重组子的转移、重组子的筛选和鉴定、克隆基因的表达；（3）转基因生物，包括植物、动物和微生物；（4）基因工程的安全性，包括实验操作的安全性和转基因生物的安全性。本书除重点介绍基因工程的基本理论外，还引用了的科研成果，力求新颖和易懂。

本书可作为生物、农林、医学和制药专业本科生的参考教材，也可以作为该领域中研究人员的参考书使用。

章绪论

1.1基因工程的基本定义

1.2基因工程的诞生

1.3基因工程的发展历程

1.4基因工程的技术路线

1.5基因工程的研究内容

1.5.1克隆工具

1.5.2基因克隆技术

1.5.3目的基因

1.5.4基因工程的应用研究

1.5.5基因工程的安全性研究

1.6学习和研究基因工程的意义

复习题

第2章基因工程的工具酶

2.1限制性核酸内切酶

2.1.1限制性内切酶的发现与分类

2.1.2限制性核酸内切酶的命名

2.1.3Ⅱ型限制性核酸内切酶的基本特性

2.1.4影响限制性核酸内切酶酶解反应的因素

2.1.5限制性核酸内切酶的应用

2.2DNA连接酶

2.2.1DNA连接酶的种类

2.2.2DNA连接酶的机理

2.2.3影响DNA连接酶的反应条件

2.3DNA聚合酶

2.3.1大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ

2.3.2Klenow片段

2.3.3T4噬菌体DNA聚合酶

2.3.4T7噬菌体DNA聚合酶

2.3.5测序酶

2.3.6Taq DNA聚合酶

2.3.7反转录酶

2.4其他工具酶

2.4.1末端脱氧核苷酸转移酶

2.4.2T4多核苷酸激酶

2.4.3碱性磷酸酶

2.4.4单链核酸内切酶

2.4.5核酸外切酶

2.4.6甲基化酶

复习题

第3章基因工程载体

3.1质粒

3.1.1质粒的基本生物学特性

3.1.2构建质粒克隆载体的策略

3.1.3质粒载体的构建

3.1.4质粒的种类和用途

3.1.5经典的大肠杆菌质粒载体

3.1.6质粒载体的稳定性问题

3.2噬菌体载体

3.2.1λ噬菌体载体

3.2.2M13噬菌体载体

3.3噬菌体质粒杂合载体

3.3.1柯斯质粒载体

3.3.2噬菌粒载体

3.4人工染色体载体

3.4.1酵母人工染色体载体

3.4.2细菌人工染色体载体

3.4.3P1人工染色体载体

3.4.4哺乳动物人工染色体

3.4.5人类人工染色体

3.4.6植物人工染色体

复习题

第4章受体细胞

4.1原核受体细胞

4.1.1大肠杆菌

4.1.2枯草芽孢杆菌

4.1.3蓝细菌

4.2真菌受体细胞

4.2.1酵母菌

4.2.2丝状真菌

4.3真核受体细胞

4.3.1植物细胞

4.3.2动物细胞

复习题

第5章目的基因的制备

5.1直接分离法

5.1.1限制性内切酶酶切分离法

5.1.2利用酶促反转录法直接从特定mRNA分离基因

5.1.3机械方法

5.1.4物理化学法

5.2化学合成法

5.2.1化学合成法的原理

5.2.2化学合成法的步骤

5.2.3化学合成法的应用

5.3PCR扩增目的基因

5.3.1PCR反应特点

5.3.2PCR克隆目的基因

5.3.3PCR技术改造已知基因

5.4构建基因文库分离目的基因

5.4.1基因文库的构建

5.4.2基因文库构建的注意事项

5.4.3基因组文库与cDNA文库的区别

5.4.4克隆的鉴定方法

5.5根据基因的差异表达分离目的基因

5.5.1mRNA差别显示技术

5.5.2抑制性消减杂交

5.5.3酵母双杂交技术分离目的基因

复习题

第6章DNA重组的操作

6.1重组子的构建

6.1.1相同黏性末端连接

6.1.2不同黏性末端的连接

6.1.3平末端连接

6.1.4修饰黏性末端连接

6.1.5PCR产物的连接

6.1.6影响外源DNA片段与载体DNA连接反应的因素

6.2重组DNA分子的转化和扩增

6.2.1Ca2 诱导转化

6.2.2电穿孔转化方法

6.2.3接合转化法

6.2.4λ噬菌体转导法

6.2.5转染

6.2.6转化率及其影响因素

6.3重组子的筛选与鉴定

6.3.1表型筛选法

6.3.2结构分析法

6.3.3限制酶谱分析筛选

6.3.4PCR扩增鉴定筛选

6.3.5目的克隆的鉴定

复习题

第7章克隆基因在受体细胞中的表达调控

7.1克隆基因在原核细胞中的表达调控

7.1.1原核生物基因表达调控的特点

7.1.2原核生物基因表达的表达系统

7.1.3克隆基因在大肠杆菌中的表达调控

7.2外源基因在真核细胞中的表达

7.2.1真核生物基因表达与调控的特点

7.2.2真核细胞表达系统

复习题

第8章转基因生物

8.1转基因植物

8.1.1转基因植物的技术路线

8.1.2目的基因的选择与克隆

8.1.3植物基因转化方法

8.1.4转基因植物的筛选和鉴定

8.1.5转基因植物中外源基因的沉默

8.1.6提高目的基因在转基因植物中的高效表达策略

8.1.7转基因植物的应用

8.2转基因动物

8.2.1转基因动物的基本操作过程

8.2.2转基因动物的制备技术

8.2.3外源基因导入动物细胞的方法

8.2.4转基因动物的鉴定

8.2.5转基因动物研究中出现的问题

8.2.6提高外源基因在动物中的表达效率的策略

8.2.7转基因动物的应用

8.3转基因微生物

8.3.1微生物基因工程的技术流程

8.3.2微生物基因工程的应用

复习题

第9章基因工程的安全性

9.1转基因生物的安全性

9.1.1生物安全的含义与基本内容

9.1.2转基因生物的环境安全性

9.1.3转基因生物的健康性

9.1.4与基因工程产品安全性有关的重要事件

9.2生物安全政策、法规

9.2.1国际社会对基因工程的态度与规则

9.2.2我国基因工程安全管理措施

9.3转基因生物的安全性评价

9.4转基因生物的经济、伦理问题

9.4.1转基因生物与国际贸易和社会经济问题

9.4.2转基因生物的社会伦理问题

复习题

附录

附录1基因工程相关网站

附录2科研案例分析

附录3中英文名词解释

参考文献

范桂枝，东北林业大学生命科学院，副教授，主要教学、科学研究、实践经历（项目名称、项目来源、鉴定结论、获奖情况等）

（一）教学：

基因工程原理与技术为校级精品课程（范桂枝排第二）；

主持院级教改项目1项，参加省级、校级和院级教改项目3项（排名第二）；

课题如下：①利用多媒体课件与信息技术平台进行基因工程教学改革, 院级教改课题，2005~2007（范桂枝主持）；②“基因工程双语多媒体教学的开发与应用”，黑龙江省高等教育学会115C-783，2007~2009（结题）③“通过《基因工程》教学强化学生科研思维和创新能力的探索”，东北林业大学校级课题，2008~2010；④

作者发表“基因工程”教改论文2篇；

① 范桂枝, 李晓灿, 詹亚光. “基因工程”教学改革的思考. 中国农业教育, 2006, 6:55-56

② 范桂枝, 詹亚光. 基因工程双语电子教材建设的初步探索. 现代农业科技, 2009，3：273~274

获奖情况：

“基因工程双语电子教材建设的初步探索” 二等奖，黑龙江省高等教学学会，2010

（二）科研简介：

　　主要研究方向：植物细胞工程、逆境生理。主持国家自然科学基金、黑龙江省博士后科研启动项目、黑龙江省教育厅、中央高效基本科研业务专项资金项目等项目，参加国家自然科学基金和黑龙江省自然基金2项；以作者发表论文近30篇，其中，SCI 6篇，EI 1篇；主编教材1部，参编教材2部；获得市级学术奖励2项；获授权专利5项（其中1项，一项第二）。

在研科研课题：

（1）主持国家自然科学基金“PAs在真菌诱导白桦酯醇合成中的作用机理研究”（31100445，2012~2014）。

（2）主持黑龙江博士后科研启动项目项目“PAs、NO 和H2O2在真菌促进白桦三萜合成中的cross-talk研究”（DL09BA05，2012~2014）；

（3）主持中央高效基本科研业务专项资金项目“H2S和NO促进白桦酯醇合成中内源NO/H2S互作的初步研究”（2013~2015）

获得的专利：

范桂枝, 李晓灿, 迟德富, 詹亚光, 孙美玲, 李春雪. 硫化氢提高桑黄白桦酯醇和筋骨草蜕皮激素含量的新用途. 申请号 201210242981.1（已授权）

詹亚光, 范桂枝, 尹静，由香玲，齐凤慧，一种利用白桦悬浮培养生产齐墩果酸的方法， 2011.06, 中国（已授权）

曾经编写过哪些教材（教材名称、出版时间、字数、出版社、获奖情况等）

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